Réaliser une préparation microscopique
(fiche adaptée du groupe de travail du LLP)

 

1. Remarques préalables

- Pour qu'un objet puisse être observé convenablement au microscope, il doit être traversé par la lumière, il doit donc être très mince.
- L'objet est souvent un fragment d'origine animale ou végétale constitué d'un ensemble de cellules vivantes. L'idéal est de prélever une seule couche de cellules.
- Pour maintenir en vie les cellules prélevées, on les place dans un milieu liquide entre une lame et une lamelle.
N.B. Vous manipulerez la lame et la lamelle avec précaution pour éviter de les casser et de les salir.


  2. Les étapes de la préparation

- Après nettoyage éventuel, posez la lame propre sur la paillasse et mettez en son milieu une goutte de liquide de montage (eau ou colorant).  Les colorants permettent de mettre en évidence une ou plusieurs parties des cellules (bleu de méthylène pour le noyau, rouge neutre pour la vacuole…).

- Déposez l'objet immédiatement après son prélèvement s'il s'agit de cellules vivantes afin d'éviter sa déshydratation.

- Vérifiez que l'objet s'étale correctement dans le liquide.

- Appliquez un côté de la lamelle contre la lame. Déplacez la lamelle inclinée vers la goutte de liquide.

- Lorsque la lamelle est contre le liquide, faites-la descendre doucement pour éviter de piéger des bulles d'air.

- S'il y a trop de liquide, absorbez-le délicatement sur les bords de la lamelle avec le coin d'un papier-filtre.

- Si l'observation dure longtemps et que la préparation commence à se dessécher, déposez une petite quantité d'eau avec une pipette en plastique sur un bord de la lamelle puis nettoyer avec un papier-filtre.

- La face supérieure de la lamelle doit rester propre et sèche.